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ARTÍCULO
TITULO

Induction of embryogenic calluses from soybean (Glycine max) roots.

M. Bueno    
C. Severin    
S. Gattuso    
G. Giubileo    

Resumen

The use of calluses for the improvement of plants is an alternative procedure forthe in vitro selection of characters such as disease resistance, tolerance to draught and salinity or otherextreme conditions. The objective of this research is to develop a system for embryogenic callus productionfrom soybean roots (Glycine max) and to identify its origin through histological techniques.Apexes (1 cm in length) of soybean roots were placed in a medium MS of Murashige and Skoog afterseven days of emergence: MS1 with 135.7 µM 2,4 diclorophenoxiacetic acid (2,4-D) and MS2 with13.3 µM benciladenine (BA) and 0.2 µM naftalen acetic acid (NAA), with 2 % of sucrose and 7 % ofagar. The explants were kept dark for 15 days and were then subjected to a 16-h photoperiod. The callusesobtained were transferred to medium MS, for embryo production, supplemented with 1.66 µMindol butiric acid (IBA) and BA at different concentrations: 0.89; 1.78; 3.55 and 4.44 µM. The frequencyof callus formation was 70 %. In the zone of the pericycle, histological studies showed the presenceof cells with meristematic characteristics, like large central nucleus and dense cytoplasm beforethe seventh day from the in vitro inoculation, which indicates the initiation of callogenesis. The formationof embryogenic zones was observed in calluses alter 45 days of inoculation, while nodular formationswith embryogenic characteristics were obtained after 40 days. To our knowledge, this is the firstreport about embryogenic callus production from soybean roots. El empleo de callos en programas de mejoramientogenético es una vía alternativa en laselección in vitro para caracteres como resistenciaa patógenos, sequía, tolerancia a salinidad uotras condiciones extremas. El objetivo del presentetrabajo fue desarrollar un sistema de producciónde callos embriogénicos a partir de raícesde soja (Glycine max (L.) Merr) cv.Williams e identificar el origen de los mismosmediante técnicas histológicas. Se sembraronápices de raíces de soja de 7 días (1 mm) enmedio MS de Murashige y Skoog conteniendo135,7 µM de ácido 2,4 diclorofenoxiacético(2,4-D) MS1 y 13,3 µM de benciladenina (BA)y 0,2 µM de ácido naftalen acético (ANA)MS2, en ambos casos con agar-agar 2% y 0,7%.Los explantos permanecieron 15 días en oscuridady luego con fotoperíodo de 16 h. Los callosobtenidos fueron transferidos a medio para laproducción de embriones: MS, suplementadocon 1,66 µM de ácido indol butírico (AIB) ydistintas concentraciones de benciladenina(BA) 0,89; 1,78; 3,55 and 4,44 µM. La frecuenciade formación de callos fue 70%. A través deestudios histológicos se determinó la presencia,en la zona del periciclo, de células con característicasmeristemáticas, núcleo central grande ycitoplasma denso antes de los 7 días desde lasiembra in vitro, lo que estaría indicando elmomento de la callogénesis. La aparición dezonas embriogénicas se visualizaron en loscallos a partir de los 45 días, las observacioneshistológicas muestran a los 40 días formacionesnodulosas con características embriogénicas.Los resultados de este trabajo constituyen laprimera mención sobre la producción de callosembriogénicos en raíces de soja

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